Hva er meningen med PCR-nukleinsyredeteksjon, metoder og trinn
Nukleinsyretesting er for tiden en effektiv måte å avgjøre om viruset bærer det nye koronaviruset. For tiden bruker folk hovedsakelig neseprøver, svelgprøver og antistoffserum lgm som referanse. Men i henhold til de siste Singapore-kravene, utføres PCR-nukleinsyretesting, så hva betyr PCR-nukleinsyretesting?
Hva er meningen med PCR-nukleinsyredeteksjon
PCR betyr polymerasekjedereaksjon, som kan brukes til å amplifisere DNA, for å amplifisere en liten mengde DNA i den grad det kan påvises. Nukleinsyren til noen virus er DNA, og denne metoden må brukes for påvisning. Derfor er ikke PCR en sjekk utført, men en metode for å påvise DNA. For eksempel bruker hepatitt B-virus DNA kvantifisering denne metoden. Formålet med DNA-inspeksjon er å diagnostisere sykdommen på den ene siden. Hvis til og med DNA til patogenet kan påvises, betyr det at patogenet er infisert; på den annen side er det å bedømme hvor mye viruset har replikert, for å bedømme alvorlighetsgraden av sykdommen eller effekten av behandlingen.
PCR-nukleinsyredeteksjonsmetoder og trinn
Nukleinsyretesting krever fem trinn: prøvetaking, prøveoppbevaring, retensjon, nukleinsyreekstraksjon og datamaskintesting.
Det første trinnet i nukleinsyredeteksjon er å samle sekret fra mennesker, og tørke av nesehulen eller bakveggen i svelget og bilaterale svelgmandler med en nesetest eller en svelgtest.
I det andre trinnet beholdt det medisinske personalet prøven, senket teststykkehodet ned i cellekonserveringsløsningen og skrudde på rørhetten umiddelbart etter å ha brutt halen.
I den tredje delen legger du prøven i en lufttett pose, oppbevar den og send den til inspeksjon i tide.
Det fjerde trinnet er å sende prøven til laboratoriet for å trekke ut nukleinsyre.
I det femte trinnet blir ekstraktet utsatt for en fluorescerende PCR-amplifikasjonsreaksjon.
Hva er nukleinsyre
Nukleinsyre (nukleinsyre) er en type biologisk makromolekyl sammensatt av nukleotider (nukleotid), delt inn i ribonukleinsyre (RNA) og deoksyribonukleinsyre (DNA), hvor RNA stort sett er enkeltkjedestruktur, DNA er stort sett dobbelttrådet struktur. I tillegg til prion er nukleinsyre et biologisk makromolekyl som er nødvendig for livet. Dens hovedfunksjon er å utgjøre livets genetiske informasjonsbærer. I tillegg kan noen nukleinsyrer brukes som og delta i dannelsen av biologisk aktive enzymer. Molekyler eller andre molekylære maskiner.
Hva er nukleinsyretesting
Nukleinsyredeteksjon, som navnet tilsier, er å oppdage nukleinsyrer.
Hva er de unike fordelene med nukleinsyretesting? Hvorfor kan den brukes som"gullstandard" for diagnostisering av nytt koronavirus?
Faktisk har hver deteksjonsmetode sine egne applikasjonsscenarier. For å ta virusdeteksjon som et eksempel, er deteksjonsobjektet for de vanlige immunologiske deteksjonsmetodene (kolloidalt gull, ELISA, kjemiluminescens, etc.) antigenet eller antistoffet til viruset, som tilsvarer"side tegning". Siden det er et tidsvindu fra infeksjon til påvisbarhet, er immunologiske påvisningsmetoder generelt ikke egnet for tidlig diagnose.
Hva er meningen med PCR-nukleinsyredeteksjon, metoder og trinn
Falske positive og falske negative
1. Falsk positiv
Det er vanligvis færre falske positiver. Vanligvis kan feil bruk av laboratoriepersonell føre til krysskontaminering mellom prøver eller gjenværende kontaminering av forsterkede produkter. I dette tilfellet kan falske positiver forårsakes.
Imidlertid kan falske positiver effektivt omgås ved å strengt kontrollere deteksjonsprosessen og implementere en strategi for tilfeldig deltakelse i påvisningen av flere negative prøver.
2. Falsk negativ
Det som må forklares her er at falske negative ved PCR-deteksjon og kliniske falske negativer faktisk ikke er det samme konseptet.
Med diagnosen av det nye koronaviruset, som diskuteres intenst på internett, som et eksempel, refererer kliniske falske negativer til tilfeller der de kliniske symptomene og bildediagnostiske studier er sterkt mistenkt for å være infisert, men PCR-testen er gjentatte ganger eller alltid negativ; og PCR-testen falsk negativ refererer til den innsamlede. Det er en tilstrekkelig mengde av det nye koronaviruset i prøven, men det har ikke blitt oppdaget.
For å unngå falske negativer i nukleinsyretesting, er de viktigste behovene som må løses: (1) det er tilstrekkelig med virus i cellene til den infiserte personen, (2) celler som inneholder viruset kan samles i den innsamlede prøven, og (3 ) viruset i prøven oppdages Disse tre koblingene.
Blant dem påvirker de tekniske parametrene til PCR-sett hovedsakelig den tredje deteksjonskoblingen.
Bare for den tredje testlenken, hvis antallet virus i prøven er under et visst nivå (under minimumsdeteksjonsgrensen), vil ikke PCR-settet kunne oppdage det. Fra dette perspektivet kan falske negativer i PCR-deteksjon ikke unngås helt. Dette er grunnen til at det er nødvendig å supplere utviklingen av virusspesifikk antistofftesting.