Den grunnleggende prosessen for PCR-deteksjon av nytt koronavirus
1. Prøvetaking: Samtidig innsamling av prøver fra øvre luftveier (inkludert nasopharynx og orofarynx) og nedre luftveier (inkludert sputum, luftrøraspirat eller bronkoalveolær skyllevæske) for nCoV-deteksjon ved RT-PCR. Der nedre luftveisprøver er lett tilgjengelige: bruk passende PPE for prøvetaking (merk URT-prøver for dråper- og eksponeringsforholdsregler og LRT-prøver for luftbårne forholdsregler) Ved innsamling av URT-prøver, bruk virusprøvetakingsservietter (steril polyester eller rayon i stedet for bomull) og virustransportmedium. Ikke ta prøver fra neseborene eller mandlene. For mistenkte nCoV-pasienter, spesielt lungebetennelse eller alvorlige pasienter, kan ikke en enkelt URT-prøve utelukke diagnosen, og det anbefales å øke URT- og LRT-prøvene.
2. Nukleinsyreekstraksjon: nukleinsyreekstraksjonsinstrument eller manuell nukleinsyreekstraksjon
1), ikke behov for instrumenter, bruk manuell ekstraksjon
Utstyr og laboratorieforbruksvarer som kreves for nukleinsyreekstraksjon og prøveisolering:
biologiske sikkerhetsskap (funksjoner: separering av prøver, levering av personell, prøver og miljøvern),
Desktop høyhastighets kjølt sentrifuge (funksjon: hastighet Større enn eller lik 12000 RPM, nukleinsyreanalyse, etc.),
Lavtemperatur kjøleskap (funksjon: reagenslagring),
Metallbad, pipette (funksjon: presis dosering),
Steriliserte sentrifugerør (funksjon: separasjon av nukleinsyrer, etc.),
Latekshansker (funksjon: anti-forurensning),
Absolutt etanol, isopropanol, DNase og RNase fritt vann (vann ikke behandlet med DEPC).
3. Automatisk nukleinsyreekstraksjonsinstrument: (automatisk ekstraksjon, 32 prøver kan ekstraheres en gang i 26 minutter)
Den matchende forhåndsinstallerte platen lastes direkte og trekkes ut direkte på maskinen:
4. Fluorescens kvantitativ PCR-deteksjon:
Nødvendig utstyr og forbruksmateriell: biologisk sikkerhetsskap (funksjon: prøveforberedelse, tilveiebringelse av personell, prøver og miljøvern),
Fluorescens kvantitativt PCR-instrument (funksjon: PCR-amplifikasjonsdeteksjon og analyse),
Desktop høyhastighets kjølt sentrifuge (funksjon: hastighet Større enn eller lik 12000 RPM),
Lavtemperatur fryser (prøvelagring ved -86 grader, reagenslagring ved -20 grader og 4 grader),
oscillator, (blanding)
Graderte pipettespisser (Funksjon: nøyaktig lasting), 1-10ul Size
Steriliserte sentrifugerør (0.5/1.5/2ml),
0.2ml optisk kvalitet PCR-rør/plate (funksjon: PCR-reaksjonsrør),
Latekshansker (funksjon: anti-forurensning).
Nukleinsyreekstraksjon, reaksjonssystemkonfigurasjon og tolkning av resultater er underlagt kitinstruksjonene.
