Som det sies, hvis en arbeider ønsker å gjøre en god jobb, må han først skjerpe verktøyene sine. Valg av forbruksvarer er svært viktig for å oppnå tilfredsstillende PCR-eksperimentresultater. Ved analyse av PCR-resultater fokuserer vi ofte på analyse av primere, enzymkonsentrasjon, temperatur og tid, men ser bort fra at PCR-forbruksvarer også er en av påvirkningsfaktorene. Det finnes mange typer PCR forbruksvarer, hvordan velge riktig PCR forbruksvarer? Her er noen spørsmål som hjelper deg med å finne svaret.
pcr forbruksvarer
1. Hvorfor er PCR-forbruksvarer vanligvis laget av PP?
Enten det er vanlig PCR eller sanntids fluorescens kvantitativ PCR (qPCR), vil forbruksvarer vanligvis være i direkte kontakt med reagenser eller prøver, så materialer av høy kvalitet og gode prosesseringsteknikker kreves i produksjons- og klargjøringsprosessen. Generelle forbruksvarer er laget av polypropylen (PP). Polypropylen (PP) er et biologisk inert materiale, overflaten er ikke lett å feste til biomolekyler, og har god kjemisk resistens og temperaturtoleranse.
2. Hvordan velge PCR-rør/plater med ulikt volum?
Vanlige volumer for PCR-rør/plater:
• Enkeltrør/{{0}}rør/12-rør: 0.5mL, 0.2mL, 0.1mL
• {{0}}brønnplate: 0.2mL, 0.1mL
• {{0}}brønnplate: 0,02mL
Spesifikasjoner for PCR-rør/plater:
Velg riktig produkt i henhold til de spesifikke eksperimentelle kravene. Volumet til de fleste PCR-rør kan oppfylle kravene til PCR-reaksjoner. Kapasitetsspesifikasjonene er tilgjengelige i standard kapasitet og lav kapasitet. Generelt anbefales det å velge lavkapasitetsrør først. Fordi lavvolumsreaktorrørene/-platene har mindre takhøyde, forbedres varmeoverføringen og fordampningen reduseres. Samtidig er det nødvendig å unngå å tilsette for mye eller for lite prøve ved tilsetting av prøver. For mye kan føre til redusert varmeledningsevne, søl og krysskontaminering, mens for lite kan føre til tap av prøvefordampning.
3. Hva er forskjellen mellom flatt deksel/konveks deksel av enkeltrør eller 8-radrør?
Når prøvevolumet er lite, foretrekkes enkeltrør eller {{0}}rør. Men når reaksjonsvolumbehovet er stort, råder enkeltrør, og volumet kan nå 0,5 ml. Det finnes to typer enkeltrør og 8-rør med flatt deksel og konveks deksel, hver har sine egne fordeler. Flat cap gir presis fluorescerende signallevering for qPCR; lett å skrive på tusjer. Det konvekse dekselet er i kontakt med PCR-instrumentdekselet for å redusere rørdeformasjon forårsaket av trykk; Det vil imidlertid påvirke overføringen av fluorescerende signaler og kan ikke brukes på qPCR-eksperimenter.
4. Hva er forskjellene i bruksscenarioene for forskjellige 96-brønnplater?
96-brønnplater er vanligvis delt inn i plater uten skjørt, plater med halvskjørt og plater med full skjørt.
Skjørtløse plater: Kompatibel med de fleste termiske syklere eller qPCR-maskiner, men ikke egnet for automatiserte applikasjoner. Stabiliteten er ikke høy under pipeteringsprosessen, og den må brukes med en plateholder.
Halvskjørtplate: Den kan tilpasses for å merke eller påføre strekkode, og automatisk påføring, og har god pipeteringsstabilitet.
Full skjørtplate: veldig egnet for automatiserte laboratorieapplikasjoner, men også egnet for etiketter og strekkodeapplikasjoner. God mekanisk styrke, egnet for PCR-maskiner med utstående moduler, og høy stabilitet under pipettering.
5. Er PCR-platen/rørmaterialet tykkere og mer stabilt?
Nei. PCR-forbruksvarer må ha en jevn veggtykkelse for å gi jevn varmeoverføring. Den ultratynne rørveggen er 50 prosent tynnere enn standardversjonen, noe som kan redusere den termiske barrieren ytterligere, noe som resulterer i raskere og bedre respons.
6. For 96-brønn- eller 384-brønnplater, hvorfor er ikke de kuttede hjørnene og etikettene de samme?
Hjørneskjæring: Valget av hjørneskjæringsposisjonen til PCR-platen avhenger av kravene til det tilpassede instrumentet for enkel posisjonering.
Identifikasjon: Alfanumeriske markeringer på PCR-plater hjelper til med å identifisere individuelle brønner og prøveplasseringer. Vanligvis er det en logo med hevet fargenummer eller en gravert logo. For noen automatiserte påføringsforsøk vil reaksjonsplaten med påtrykte merker være bedre forseglet.
7. Noen PCR-platebrønner stikker ut, mens andre er flate. Hvilken er bedre?
Det som passer er bra. Vanlige PCR-plater har to typer: flate brønnkanter og forhøyede brønnkanter. Reaksjonsplate med flat brønnkant, egnet for de fleste termiske syklister. Reaksjonsplaten på kanten av stigerørshullet er praktisk for forsegling, noe som kan redusere risikoen for krysskontaminering mellom prøvene.
8. Hvordan velge PCR-rør/plater i forskjellige farger?
For vanlige PCR-reaksjoner kan transparente brukes. I sanntids PCR-reaksjonen er følsomheten og konsistensen til det hvite røret relativt høyere. De hvite rørveggene hindrer fluorescens i å passere gjennom rørveggene og brytning, og forhindrer derved at fluorescensen passerer til varmemodulen, absorberes av modulen eller reflekteres inkonsekvent. Sammenlignet med gjennomsiktige rør, kan sterkere og mer fokuserte fluorescenssignaler samles på toppen av hvite rør.