Celleforming involverer trinnene med celleinjeksjon, forming og oppnåelse. Cellene i cellekulturkolben må vokse og utvikle seg til en viss grad. I dette øyeblikket er det nødvendig å stole på trypsin for å fordøye cellene på den ytre veggen av kolben og deretter føle det. Når det gjelder enzymer, må fordøyelsestiden kontrolleres.
T75 cellekulturkolbe
Trypsin tilhører en annen klasse trypsin, som kan bryte ned proteiner på cellemembraner smeltet sammen med cellekulturflasker. Ved å løse opp proteinet på den tilsvarende delen, løses proteinet i krysset mellom proteinene, og cellen blir sfærisk på grunn av støttekraften til cellerammen til sin egen indre struktur, og skiller derved cellene. Nivået av trypsinfordøyelse er en nøkkelfaktor i celleformingen: overdreven fordøyelse øker celleavfall, svart rusk øker, cellene vil falle av som en helhet, noe som alvorlig setter cellelevedyktighet i fare, og noen celler flyter, med den kasserte trypsinutstrømningen; hvis fordøyelsen ikke er nok, er det vanskelig for cellene å blåses ned fra innerveggen i flasken, og den kontinuerlige blåsingen og bankingen vil også skade celleaktiviteten.
cellekulturkolbe
Flaske med serumproteinkulturløsning
I forskjellige institusjoner eller celler er effekten av bukspyttkjertelenzymer ikke den samme. Aktiviteten til de dispergerte bukspyttkjertelenzymcellene er også relatert til dens konsentrasjonsverdi, temperatur og effektvarighet. Når pH er 8.0 og temperaturen er 37, er effektnivået til den vandige løsningen av pankreasenzymet relativt sterkt. Ved påføring av trypsin bør konsentrasjonen, temperaturen og varigheten kontrolleres godt for å forhindre celleskade forårsaket av overdreven fordøyelse. Fordi Ca2, Mg2 og serumprotein reduserer proteingram aktiviteten til pankreatin, så når du tilbereder vandig løsning av pankreatin, bruk BSS uten Ca2, Mg2, for eksempel: D-Hanks-løsning. Ved stopp av fordøyelsen kan trypsin stoppes med serumproteincellekulturmedium eller trypsinretarder for å stoppe effekten av trypsin på cellene.
kulturkolbe
T25 cellekulturkolbe
I tillegg, hvis det er en nyinnkjøpt celle, kan du bruke en lavere konsentrasjon av trypsin for å utforske fordøyelsestiden først, og observere om cellene blir runde hvert minutt, og lage en god rekord. Alt i alt, når man får cellene i cellekulturkolben, er det nødvendig å kontrollere trypsiniseringstiden, for å effektivt opprettholde levedyktigheten til cellene.