4 grunner til forurensning under PCR-eksperimenter

Jan 26, 2022 Legg igjen en beskjed

På grunn av utbruddet av det nye koronaviruset har byggingen av PCR-genforsterkningslaboratorier på ulike steder gradvis akselerert. Viral nukleinsyredeteksjon er en viktig standard for diagnostisering av ny koronar lungebetennelse. PCR-laboratoriet, også kjent som genforsterkningslaboratorium, vedtar molekylærbiologiteknologi. Ved å forsterke nukleinsyrefragmenter kan det også betraktes som en spesiell nukleinsyrereplikasjon in vitro. Gensporingssystemet brukes til å forstå virusinnholdet i menneskekroppen, og deteksjonsnøyaktigheten kan nå nanometernivået. Ny coronavirus nukleinsyredeteksjon tilhører også denne kategorien teknologi og er en viktig standard for diagnostisering av ny koronar lungebetennelse.

PCR-genforsterkningslaboratoriet forsterker hovedsakelig deteksjonskjernesyremalen. Det kan ses at krysskontaminering mest sannsynlig vil forekomme i laboratoriet, noe som resulterer i falske positive resultater i testprøver. Derfor har PCR-laboratorier strenge designkrav og standarder.

Nå har PCR-teknologi blitt mye brukt innen smittsomme sykdommer, tumormålretting, reproduktiv genetikk, etc. På grunn av den mange og store forsterkningen av nukleinsyren som skal testes av denne teknologien, kan selv en svært liten mengde forurensning lett føre til andre, PCR De tekniske kravene er relativt høye, og den eksperimentelle prosessen er komplisert. Hvis det er utelatelser i de mellomliggende koblingene, kan falske negative resultater bli forårsaket.

1. Det er forurensning av PCR-forsterkningsprodukter. Det er også den vanligste årsaken til forurensning. Etter gjentatt forsterkning av PCR-produkter overskrider mengden replikering langt deteksjonsgrensen for PCR, så selv en svært liten mengde forurensning er nok til å forårsake falske positiver i eksperimentelle resultater.

2. Reagensforurensning. Under reagenspreparatet kan kontakt med forurensede beholdere, pipetter, pipettespisser, løsninger, etc., føre til forurensning av reagenser.

3. Prøven som skal testes er forurenset. Beholderen der prøven er plassert, er forurenset eller prøven er forurenset på grunn av den dårlige forseglingen av beholderen; For det andre vil bruk av forurensede pipetter eller pipettespisser under nukleinsyreutvinningsprosessen føre til forurensning av prøven; I tillegg inneholder noen prøver virus, Hvis diffusert i luften, krysskontaminering kan oppstå.

4. Aerosolforurensning. Hvis aerosolen inneholder virus og andre miljøgifter og sprer seg i luften, er det svært sannsynlig å forårsake PCR-produktforurensning. Aerosoler er skapt av friksjon mellom luft og overflaten av en væske. Åpning av lokket, risting av reaksjonsrøret og gjentatte ganger aspirering av forurensningsprøven kan danne aerosoler som kan føre til krysskontaminering. Etter beregning kan en aerosolpartikkel inneholde 48.000 deler, så spesiell oppmerksomhet bør gis til forurensningen forårsaket av aerosol. Så lenge PCR-laboratoriet er forurenset, er den forrige resultatrapporten ugyldig og andre eksperimentelle operasjoner kan ikke utføres. Forurensningskilden må identifiseres og fjernes grundig for å oppnå nøyaktige og effektive eksperimentelle resultater.